血铅检测的几种方法

发布时间03年04月23日 10时27分

　　
    一般认为有四种。红细胞原卟啉（EP）的测试法、原子吸收光谱法（AAS）、塞曼效应石墨炉原子吸收光谱法（GFAAS）、阳极溶出伏安法（ASV）。

什么是红细胞原卟啉（EP）测试法？

    红细胞原卟啉（EP）升高可以间接反映出人体血铅的含量。在正常情况下原卟啉（EP）和铁在铁络和酶的作用下在红细胞内结合生成血红素。在铅负荷增高的情况下铁络和酶受到抑制，原卟啉（EP）在红细胞内堆积。在红细胞中，90%的原卟啉（EP）会以锌原卟啉（ZPP）形式存在（ZPP）在光照射下会发射429nm的荧光，用血液荧光测定法即可测得ZPP的含量。

    因为EP对光敏感，因此在标本送检过程中应注意避光，应尽快进行测定。同时EP增高除了见于铅中毒外，还见于缺铁性贫血、感染和先天性卟啉代谢异常性疾病（血友病等）在测试首先一定要先排除这些造成EP增高的可能。

    依据是大量的研究结果表明：在铅浓度为10ug/dl~25ug/dl时，用EP法检测，其诊断的灵敏度和精度都是非常低的。而这一血铅水平已明确对儿童健康有害。所以用EP法检测会造成儿童实际血铅水平较高而测量结果较低，即假阴性现象出现。在美国，1991年发表的《预防幼儿铅中毒》中，CDC已明确表示不能再用EP测试法来进行儿童铅含量的普查。

什么是原子吸收光谱法（AAS）？

    原子吸收光谱法是一种常规的元素分析法 ，可以用来分析常规样品中铅含量。它是基于铅所产生的原子蒸汽对特征谱线的吸收作用来进行定量分析。首先将试液喷射成雾状进入燃烧火焰中，含铅盐的雾滴在火焰温度下挥发并离解成铅原子蒸汽，在用铅空心阴极灯作光源，它辐射出283.3nm的铅特征谱线的光，当通过一定厚度的铅原子蒸汽时，部分光被蒸汽中基态的原子吸收而减弱。通过单色器和检测器测得铅特征谱线被减弱的程度，即可求得试样中铅的含量。

    对于用火焰原子吸收法做人体血铅含量分析，无论是用甲基异丁酮萃取血铅抑或是用螯合剂，它是一种旧的技术，由于对人体产生影响的血铅是微量的，再加上铅是易挥发且电离电位较低的元素。使用火焰原子吸收光谱，铅的原子化率是非常低的，即它的灵敏度是达不到检测人体血铅的检测范围。并且此方法所需的静脉血量较多（5~7毫升）。同时由于在处理血样的过程中是*暴露在环境（如灰尘）中和血样进行硝化处理过程中使用国产硝酸本身的铅含量过高，因此可能造成对血样的二次污染，会造成儿童实际血铅水平较低而测量结果较高，即假阴性现象出现。

什么是塞曼效应石墨炉原子吸收光谱法（GFAAS）？

    石墨炉原子吸收光谱测定法已被有效的用来测定血液中铅含量。现代的原子炉测定仪器是可靠、准确、高精度和全自动的。现有的几家生产商在市场上销售的原子石墨炉仪器都有测定血铅含量的功能（可被设置）。这类仪器要有塞曼效应背景修正系统，并保证用于分析铅的波长稳定在283.3nm。 由于对人体产生影响的血铅是微量的，再加上铅是易挥发且电离电位较低的元素，如果使用一般火焰的原子光谱，铅的原子化率是非常低的，即它的灵敏度是达不到检测人体血铅的检测范围而使用石墨炉原子吸收光谱可以大大提高铅的原子化效率，使灵敏度大幅度增加而达到检测血铅的检测范围。但石墨炉原子吸收光谱受光散射和分子吸收的影响比火焰原子吸收量大，因此有必要对石墨炉原子吸收光谱进行背景校正，一般选择塞曼效应校正背景。所以塞曼效应校正背景是通过旋转的检偏器把空心阴极灯的光分成平行于磁场的偏振光PII和垂直于磁场的偏振光PI，在石墨炉加上11K高斯的*磁场。这时吸收线便分裂为π、δ+、δ-三个成分。检偏器和调制器一起旋转，使PII和PI以一定频率交替的通过原子化器。由于吸收线的π成分只吸收PII不吸收PI，故可利用PII测出原子吸收和背景吸收，PI不被π、δ+、δ-吸收，可以利用PI来测定背景吸收，两组吸收讯号经电子系统处理（减法），既得到真实的原子吸收讯号，达到校正背景的目的。

    同时，在使用塞曼效应石墨炉原子吸收光谱来测定血铅时，要注意以下几个方面的问题：

    1、在采血后对血样进行硝化处理过程中，由于此过程血样是*暴露在环境（如灰尘）中，因此一定注意环境中的铅污染血样。

    2、在采血后对血样进行硝化，硝化的作用是去除血液里的纤维素，使铅以游离态的形式存在于溶液中，处理过程中有时使用国产硝酸本身的铅含量就很高，甚至会高于血样的铅含量，因此有必要在使用硝酸对血样进行硝化处理前先检测硝酸的铅含量并采取措施降低硝酸的铅的含量，避免血样的二次污染。

    3 、在使用塞曼效应石墨炉原子吸收光谱来测定血铅时必须要有专业技术人员来完成此操作过程。

什么是阳极溶出伏？ 安法 （ASV）

    阳极溶出伏安法 （ASV）是测量各种间质中多种金属的一种电化学分析方法，它被用来测定血铅的浓度已有25年多的历史。虽然此技术比较直接，而且仪器也不贵，但此技术方法在分析时所要求使用的每个试剂的价格却比石墨炉原子吸收法所用试剂价格要高，用阳极溶出伏安法的仪器体积很小，比石墨炉原子吸收法所用设备占用的空间也小，并且也不要求别的特殊辅助设备。这种分析方法的原理是要求铅必须从其复合物中分离出来，并且以游离态Pb2+离子存在，在镀汞的石墨电极上加负的电势使游离Pb2+被电镀在镀汞的石墨碳电极表层。再在一个特定的电压值上，铅离子又会从电极上溶出，在此过程中将产生一定的电流，而此电流值正好与血样中铅浓度的大小成比例。