北京瀚时天晖分析仪器有限公司--专业研制生产销售：

原子吸收光谱仪（CAAM-2001系列）、金属套玻璃雾化器（WNA-系列）、氢化物发生器（WHG-103A型）、高性能空心阴极灯，电子天平、微波消解仪等以及各种实验室装备仪器及耗材。：  84782259

氢化物发生原子吸收法测定血液头发中痕量硒

在硒的生物化学作用被逐渐认识的今天,要求提供的分析数据.由于经典的荧光光度法测定硒,条件比较苛刻,本文采用氢化物发生原子吸收法测定了人体、全血头发样品中硒的含量。在确定了仪器的*工作条件的基础上,着重研究了测定全血,头发样品中硒的前处理方法及干扰试验.本法相对标准偏差小于0.5%,标准加入回收率在95.7~102%之间,适用于开展流行病学调查和临床分析的研究.

实验部分

一  仪器及工作条件

原子吸收光谱仪

氢化物发生器（WHG-103A型）

金属套玻璃雾化器（WNA-1型）

硒空心阴极灯

电热石英管

波长196.0nm,灯电流5mA,狭缝1.3nm,空气流量1.00kg·cm^-2, 乙炔流量0.05kg· cm^-2 ,测量方式直示,计算方是用峰高,校准曲线或标准加入方法曲线,计算时间13s,延迟时间0.5s,进样量3ml,载气流速Ar100ml·min^-1 ,进样时间30s,反应时间15s.

二 试剂                                                                   

硒（IV）标准贮备液:1000ug·ml^-1,由高纯硒粉配置.硒中间标准溶液5ug·ml^-1.

硼氢化钾:1.5%溶液中含有0.1%的氢氧化钠,用时现配.

亚沸蒸馏水

三  试样处理

准确取0.20ml血液试样或0.2000g头发试样于20ml（12mm）刻度石英试管中,加入2ml浓HNO3,放置过夜,次日在加入0.5mlHClO4,置于160ºC恒温沙浴中加热消化至溶液成呈淡黄色后（约4h）,加入1mlH2O2,继续加热消化至溶液清亮（约1h）取出,测定前用HCl（30%）溶液定容.

于试样处理的同时制备试剂空白.

四  校准曲线的绘制

校准曲线

用微量定量取样器吸取硒中间表准溶液,0,10,30,50和70ul分别放入50ml量瓶中,用HCl（30%）溶液稀释到刻度,获得浓度分别为0,1.0,3.0,5.0和7.0ng·ml 硒的标准系列溶液.

标准加入法曲线

移取10ml试样+10mlHCl（30%）:10ml样液+10ml 2ng·ml^-1硒标准溶液; 10ml样液+10ml 10ng·ml^-1硒标准溶液; 10ml样液+10ml 14ng·ml^-1硒标准溶液,制成均含HCL（30%）溶液的硒标准加入法系列溶液.

结果与讨论

 一  试样前处理方法的考察

试样的前处理是至关重要的.目前测定硒的前处理方法普遍采用湿法消化,常用的分解装置有高型烧杯,三角锥瓶,高压分解坩锅和配有回流冷凝器的凯氏烧杯.由于前两种装置分解式样时,使用的酸量较大,硒易挥发损失,而且这些方法得消化液均需要转移定容,易引起较大的误差.本法采用刻度石英试管,HNO3+HclO4+H2O2+HCl氧化还原体系,于160ºC恒温沙浴中消化血液头发试样.由于石英试管上端能起到空气的冷凝回流作用,因而试剂不易挥发,试样消化*.与配有冷凝管的烧瓶消化法比较,具有操作简单,试剂和式样用量少,减少转译的误差等优点.本法与水冷凝管的凯氏烧瓶消化法比较的结果见表1.

                  表1  分解方法的比较

* X: 硒的平均值     n: 测定次数      SD: 标准偏差    RSD:相对标准偏差

二  常见共存例子的干扰试验

我们调查了存在于血液,头发中的25种共存例子对痕量硒测定的干扰试验,结果表明,下述离子（ug·ml^-1）不干扰5ng·ml^-1硒的测定:Ca（700）, Na 、Fe³⁺（500）, Mg、K（200）, Cu、Zn（5）,Ni、Mn、Al（1）, Cr⁶⁺、Co（0.2）, Mo、As³⁺、Bi、Sr、Ti、Hg、Sn²⁺ （0.1）,Si、Ba（0.5）,Pb（0.06）,Cd（0.05）以及NO3^-、ClO4^-、H2O2（0.5M）.

锑（Ⅲ）0.05 ug·ml^-1不干扰,含量≥0.1 ug·ml^-1有负干扰,但血液头发中锑的含量一般都低于此值,再者经过了相对的稀释,它不会给本法测定硒带来影响.当HNO3、HClO4、H2O2的浓度小于0.5M

时也不干扰测定.原因是盐酸介质保持了较佳浓度,可是试样中的Fe、Cu和Ni等重金属元素形成络合物避免其干扰^（1） ,这些与文献^（3） ,报道是一致的.另外还采用低浓度硒的校准曲线,使试样中基体元素的浓度得到相对稀释（100倍以上）,因而更有效地消除血液,头发试样中基体元素对测定硒的干扰.

三  校准曲线法与标准加入法结果比较

在拟定的*条件下, 准曲线法和标准加入法（图1）,对试样进行了测试.实验表明,尽管血液,头发试样中含有较复杂的基体元素,但用上述两种校准曲线所求得硒的含量是一只的.

从图1可以看出,三种校准曲线的斜率基本相同,回归分析后,相对系数均在0.9998以内.这也证明, 血液,头发中的基体元素对硒的测定均无影响.

四  本法的回收率及精密度

在血液,头发试样中分别添加硒标准,按试样处理步骤处理后进行测定,其回收结果见表2.五个平行样品的测定,方法的精密度在1.2~4.8%以内.

经过分析商业部食品检测科学研究所提供的一级标准物质（GBW08551）猪肝中的硒含量,标准值为0.94+0.05 ug·g^-1 ,本法测定值为0.93+0.04 ug·g^-1 ,准确度是令人满意的.

表 2  硒的回收率

五  应用

用本法测定人体全血（177例）头发（327例）中硒的含量,其结果与文献报道值相近^（4~11） .结果见表3.

                表 3   人体全血,头发硒平均水平

生产基地：北京市顺义区李隧镇宣庄户     ：101300

电    话：    89482733

手    机：        电子邮件：:wuanlin.cn 

市 场 部：北京市朝阳区博雅中心A 805室   ：100102

电    话：                              

网    址：www.hshth.com   www.vast-ray.com